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毒性葉酸雖為水溶性B族維生素，但大劑量服用亦可能產生，主要包括：(1)干擾藥物的作用誘發發作。葉酸和藥在腸細胞表面，也可能在大表面相互拮抗，大劑量葉酸可促使已用藥持續控制了的發生。(2)可能影響鋅的吸收(Butterworth，1989年)而導致鋅缺乏，使胎兒，低出生體重兒增加。(3)掩蓋維生素B12缺乏的早期表現而導致受損害。由于大多數合并維生素B12缺乏，過量葉酸的攝入干擾維生素B12缺乏的診斷，有可能導致嚴重Chemicalbook的不可逆轉的神經損害。鑒于上述原因，美國FDA規定每日葉酸攝入量安全上限值為1mg。并規定了葉酸強化主食的安全上限。

葉酸對新生兒神經管畸形的影響調查

有學者對美國人在2003-2006年從飲食、營養保健品中補充葉酸的研究表明，育齡婦女的葉酸攝入量是必須改進的。在NTDs高發地區，每日提供給孕婦的葉酸僅為100μg，遠低于孕婦每日需要量。

對加拿大哺乳期婦女飲食中攝入葉酸量對血液葉酸含量影響的調查研究中，得出哺乳期婦女應該每天攝入的葉酸量為400μg。葉酸在調控神經生成和程序性細胞死亡中起重要作用。

在美國食品中葉酸的強化補充使有神經閉合缺陷嬰兒的出生率下降了19%，但并不排除其他因素對此降低產生的作用。